[发明公布] 一种高特异性的细胞分泌蛋白富集方法的发明专利
[发明公布] 一种高特异性的细胞分泌蛋白富集方法的发明专利
摘要:
分泌蛋白组学的研究在疾病的早期诊断,以及疾病的治疗方面都有着广泛的应用。传统分泌蛋白富集方法多采用无血清培养,但这一培养方式存在种种弊端。本发明提供了一种二步法肽段层面富集的蛋白富集流程,极大的提高了该方法的特异性。同时,本发明引入了一种可以替代甲硫氨酸的非自然氨基酸——叠氮基代丙氨酸(Azidohomoalanine,AHA)来对细胞自身合成的蛋白进行标记。再结合近年来广泛应用的点击化学反应,可以高效地将修饰了炔基的生物素(biotin)加到AHA的插入位点。借助生物素这一标记,便能够实现对含血清的培养基中分泌蛋白的分离纯化及鉴定。
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